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賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問題，故障排查
來源:賽默飛 | 作者:賽默飛 | 發(fā)布時間: 2023-06-26 | 11013 次瀏覽 | 分享到:
問題描述可能原因解決方案
軟件問題提示后密封清洗液用完，添加后密封清洗液后仍然報錯重新啟動蠕動泵：進(jìn)入泵界面—More Options—將Rear Seal Wash的模式由Idle改為Active，**enter即可
柱溫箱溫度已達(dá)到規(guī)定范圍，但仍顯示未就緒柱溫箱的平衡時間設(shè)置過長，可在儀器方法中修改
如何查看紫外燈能量VWD：打開UV界面的“Wellness”選項即可查看燈壽命和使用時間；DAD：打開UV界面的“Wellness”選項可查看燈的使用時間，在Startup界面可查看燈能量
如何設(shè)置序列或者進(jìn)樣完成后自動打印/導(dǎo)出報告在Queue界面的“Report setup”項下進(jìn)行設(shè)置
峰面積較小的色譜峰無法自動積分在Cobra向?qū)е性O(shè)置合適的基線噪聲范圍、Cobra平滑寬度和小峰面積
如何去掉報告中的變色龍水印打開管理控制臺——全局策略——水印，將“打印水印”的勾去掉即可
Vanquish自動進(jìn)樣器無法自動識別樣品盤類型1）齒輪松動，聯(lián)系工程師；2）樣品盤上的二維碼損壞或有液滴；3）正確放置樣品盤，使A1號位在左后方
Vanquish自動進(jìn)樣器無法正常進(jìn)樣重新關(guān)好自動進(jìn)樣器的門
Vanquish自動進(jìn)樣器是否需要校正針位不需要
壓力升高色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化）比較相同條件下壓力的變化趨勢，若壓力升高，再按照下述原因進(jìn)行排查
保護(hù)柱的柱芯污染更換新的柱芯
進(jìn)樣閥load狀態(tài)壓力正常，切至inject狀態(tài)時壓力升高，可能是六通閥或進(jìn)樣針堵塞超聲進(jìn)樣針/六通閥的定子和轉(zhuǎn)子，若無效則更換
靜態(tài)混合器堵塞反沖靜態(tài)混合器，無效則更換。平常操作時：流動相的純度需要滿足分析檢測的要求、檢測泵內(nèi)密封圈的密封性
針座密封堵塞對針座密封超聲清洗
色譜柱填料塌陷引起流通池堵塞反沖流通池（注意壓力：DAD/VWD耐壓120bar；FLD耐壓20bar），無效則聯(lián)系工程師
壓力傳感線接觸不良重新拔插壓力傳感線。平常操作時注意不要觸摸到壓力傳感線接頭
新色譜柱壓力逐漸升高新色譜柱的填料在流動相作用下逐漸壓實，柱壓會逐漸升高，但使用一段時間后，相同條件下壓力會趨于穩(wěn)定
色譜柱污染按照色譜柱說明書進(jìn)行沖洗和在生，無效則更換
CAD的噴針堵塞取出噴針進(jìn)行超聲清洗（注意針尖不要和瓶底接觸）。建議檢測器入口安裝不銹鋼過濾器，阻止柱填料流失
排氣泡時未擰松purge閥排氣泡前逆時針擰松1.5~2圈
柱前預(yù)熱或者柱后冷卻器堵塞反沖，需要時更換
壓力ZUI高限設(shè)置不合適引起壓力超限根據(jù)色譜柱和儀器耐受的壓力范圍設(shè)置合適的限值
樣品/緩沖鹽析出引起管路堵塞先采用可溶性的溶劑沖洗流路。平常操作時：若流動相含有緩沖鹽，建議色譜柱先沖洗大比例水再采用初始流動相平衡；為避免樣品在流動相中析出，建議采用初始流動相溶解樣品
壓力降低色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化）比較相同條件下壓力的變化趨勢，若壓力降低，再按照下述原因進(jìn)行排查
管路沒有擰緊導(dǎo)致溶液泄露重新擰緊泄露處的管路
流動相走空加入流動相并重新排氣泡。建議在儀器方法中設(shè)置合適的壓力低限
系統(tǒng)流路中含有大量氣泡重新對流動相排氣泡，待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣
過濾頭堵塞：某通道溶液無法抽出，取下過濾頭后恢復(fù)正常超聲清洗過濾頭，無效則更換
單向閥堵塞：所有通道的溶液均無法抽出超聲清洗單向閥，無效則更換
脫氣機(jī)管路堵塞：某通道溶液無法抽出，短接脫氣機(jī)后恢復(fù)正常沖洗脫氣機(jī)管路。平常操作時建議每周采用甲醇清洗脫氣機(jī)管路，尤其水相通道
比例閥損壞：某通道溶液無法正常抽出，更換比例閥接口后恢復(fù)正常聯(lián)系工程師
針座密封發(fā)生漏液更換針座密封
排氣后忘記關(guān)閉Purge閥流動相排完氣泡后及時擰緊purge閥，但不需要擰得過緊
purge閥密封性變差更換新的purge閥
壓力傳感線接觸不良重新拔插壓力傳感線。平常操作時注意不要觸摸到壓力傳感線接頭
進(jìn)樣時吸入空氣1）設(shè)置合適的進(jìn)樣高度；2）樣品量太少時可加襯管
進(jìn)樣瞬間壓力下降，后又恢復(fù)正常U3000：正?，F(xiàn)象，吸入的樣品溶液沒有經(jīng)過預(yù)壓縮，為常壓狀態(tài)，高壓的流動相與常壓樣品接觸時會引起壓力下降；Vanquish：不會出現(xiàn)該情況
轉(zhuǎn)子發(fā)生磨損，導(dǎo)致部分流動相及樣品溶液直接排廢更換轉(zhuǎn)子
單向閥裝反重裝單向閥
壓力波動流動相含有氣泡（一般呈規(guī)律的鋸齒狀波動）重新對流動相排氣泡，待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣
過濾頭部分堵塞；流動相瓶及低壓區(qū)輸液管路被菌類或藻類污染超聲清洗過濾頭和流動相瓶，沖洗低壓區(qū)輸液管路。平常操作時建議每周采用甲醇清洗脫氣機(jī)管路，尤其水相通道
單向閥部分堵塞超聲清洗單向閥，無效則更換。平常操作時：建議儀器不要**保存在純乙腈中；若流動相中緩沖鹽濃度過高可增加泵前溶液的混合體積
輸液泵的密封圈發(fā)生泄漏更換輸液泵的柱塞桿或密封圈
流動相混合不均勻1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合
進(jìn)樣后壓力不穩(wěn)定，且保留時間重現(xiàn)性不佳在儀器方法的自動進(jìn)樣器界面設(shè)置與泵同步
脫氣盒損壞聯(lián)系工程師。平常操作時，建議：1）所有流動相的過濾頭均置于液面以下，減少真空泵的工作負(fù)荷；2）使用正相溶劑時短接脫氣機(jī)
比例閥損壞聯(lián)系工程師
計量泵裝置密封圈發(fā)生泄漏更換計量泵的柱塞桿或密封圈
保留時間前移色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化）比較相同條件下保留時間的變化趨勢，若前移，再按照以下原因進(jìn)行排查
流動相混合不均勻1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合
色譜柱未充分平衡延長系統(tǒng)的平衡時間，尤其當(dāng)流動相中含有離子對試劑時
色譜柱污染表面活性劑污染時該現(xiàn)象尤為明顯，根據(jù)色譜柱的說明書進(jìn)行沖洗，需要時更換色譜柱
固定相塌陷更換色譜柱。平常操作時：在色譜柱規(guī)定范圍內(nèi)進(jìn)行使用
緩沖鹽吸潮導(dǎo)致配置的濃度過低將易潮解的鹽置于干燥器中保存
保留時間后移色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化）比較相同條件下保留時間的變化趨勢，若后移，再按照以下原因進(jìn)行排查
流動相混合不均勻1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合
轉(zhuǎn)子發(fā)生磨損，導(dǎo)致部分流動相及樣品溶液直接排廢更換轉(zhuǎn)子
色譜柱未充分平衡延長系統(tǒng)的平衡時間，尤其當(dāng)流動相中含有離子對試劑時
系統(tǒng)流路含有氣泡重新對流動相排氣泡，待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣
流動相組成發(fā)生變化對于提前混合好的流動相，注意置于陰涼處密封保存
比例閥故障聯(lián)系工程師
柱外死體積增加更換內(nèi)徑更小、更短的管路進(jìn)行連接
保留時間不穩(wěn)定單向閥堵塞超聲清洗單向閥，無效則更換
平衡時間不足延長系統(tǒng)的平衡時間，尤其當(dāng)流動相中含有離子對試劑時
流動相混合不均勻1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合
比例閥故障聯(lián)系工程師
未設(shè)置柱溫在儀器方法中設(shè)置合適的柱溫
系統(tǒng)流路含有氣泡重新對流動相排氣泡，待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣
前延峰分離不佳，大峰前部包有雜質(zhì)小峰改進(jìn)色譜分析條件
柱頭前端過濾篩板部分堵塞更換色譜柱或低流速反沖色譜柱
色譜柱塌陷更換色譜柱,檢查色譜柱是否匹配此應(yīng)用條件（壓力或pH值范圍）
溶劑效應(yīng)1）降低進(jìn)樣量；2）降低樣品溶解液洗脫強(qiáng)度；3）調(diào)換進(jìn)樣閥接口（U3000：調(diào)換進(jìn)樣閥4、5號位；Vanquish：調(diào)換進(jìn)樣閥1、2號位）
色譜柱過載減少進(jìn)樣量或增加柱容量（選用更大內(nèi)徑色譜柱）
拖尾峰分離不佳，大峰后部包有雜質(zhì)小峰改進(jìn)色譜分析條件（緩沖鹽的濃度、流動相的pH值、洗脫條件等）
樣品與硅烷官能團(tuán)反應(yīng)（常規(guī)C18柱分析堿性化合物）建議更換封尾色譜柱、特制色譜柱或添加三乙胺等掃尾劑
柱外體積過大進(jìn)樣器和色譜柱間使用更短、更細(xì)的管路連接
色譜柱過載減少進(jìn)樣量或增加柱容量（選用更大內(nèi)徑色譜柱）
色譜柱柱效下降更換色譜柱或保護(hù)柱
檢測器響應(yīng)時間過長使用推薦值
分叉峰或雙峰分離不佳改進(jìn)色譜條件
保護(hù)柱或色譜柱污染1）更換保護(hù)柱；2）清洗或更換分析柱
柱頭死體積過大更換合適的管路接頭或更換色譜柱（色譜柱前端塌陷）
溶劑效應(yīng)1）降低進(jìn)樣量；2）降低樣品溶解液洗脫強(qiáng)度；3）調(diào)換進(jìn)樣閥接口（U3000：調(diào)換進(jìn)樣閥4、5號位；Vanquish：調(diào)換進(jìn)樣閥1、2號位）
色譜柱溫度影響一般發(fā)生在色譜柱內(nèi)徑大于3 mm，并且溫度條件很高的情況下。選用預(yù)加熱來確保色譜柱中流動相溫度不會梯度變化
儀器轉(zhuǎn)子密封磨損更換轉(zhuǎn)子密封
鬼峰上一針樣品未全都洗脫延長分析時間或改用梯度洗脫
進(jìn)樣器交叉污染1）增加洗針程序；2）清洗或更換易污染部件，如針、針座密封
CAD檢測器被污染以50%甲醇沖洗
流動相、色譜柱或流通池污染逐一排查原因，采取相應(yīng)措施，如是流通池污染可采用異丙醇以0.2ml/min低流速沖洗，特別注意水相流動相的污染
流通池有氣泡排除氣泡
不出峰未進(jìn)樣，或進(jìn)樣量不足1）保證樣品瓶中樣品量足夠；2）檢查進(jìn)樣類型是否為“Blank”
過高的背景電流/噪音（CAD）選擇純度較高的流動相
樣品容易揮發(fā)（CAD）查看分析物的蒸氣壓
色譜柱柱效下降按照說明書對色譜柱進(jìn)行在生，無效則更換色譜柱
負(fù)峰不合適的參比波長（DAD）或RI檢測器參比池未充分沖洗 DAD：設(shè)置合適的參比波長或不使用該功能；RI：增加平衡時間
樣品溶解液與流動相差別太大使用流動相溶解樣品
洗脫物比流動相吸收值低更換波長或使用低吸收溶劑做流動相
錯誤的信號輸出極性檢查信號輸出極性，請打400電話
廢液引起（CAD） 確保PEEK管在廢液瓶中
數(shù)據(jù)處理時設(shè)置了色譜圖扣除命令不使用色譜圖扣除的功能
RI檢測器未關(guān)閉參比池通道（樣品連續(xù)流過樣品池和參比池）關(guān)閉參比池通道
霧化針污染（CAD）異丙醇超聲清洗霧化針，無效則更換
毛刺峰流通池進(jìn)氣泡流通池出口增加長度的背壓管，但不能超過流通池的耐壓范圍（注意：FLD流通池耐壓＜20bar，不能增加被壓管）
電壓不穩(wěn)或儀器接地不正確常見于CAD/ECD，打400電話
CAD檢測器被污染以50%甲醇沖洗，無改進(jìn)打400電話
峰面積減小進(jìn)樣器堵塞逐段排查阻塞點，需要時請打400電話
檢測器燈能量偏低更換新燈
檢測波長設(shè)置不合理設(shè)置合理的檢測波長
待測物降解使用合適的保存條件，如使用含溫控單元的自動進(jìn)樣器
CAD霧化溫度過高，半揮發(fā)成份流失降低霧化溫度
儀器有漏液檢查漏液位置
峰面積重現(xiàn)性差自動進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子密封/針座密封發(fā)生磨損更換新的轉(zhuǎn)子密封/針座密封，需要時請打400電話
進(jìn)樣針的針尖彎曲或堵塞超聲清洗進(jìn)樣針（注意針尖不要接觸瓶底），無效則更換
進(jìn)樣前針位未處于inject狀態(tài)進(jìn)樣前，保證針位處于inject狀態(tài)
進(jìn)樣器的注射器進(jìn)氣泡進(jìn)樣前執(zhí)行灌注注射器命令排除注射器內(nèi)氣泡，需要時需手動排氣泡
自動進(jìn)樣器抽樣速度過快降低進(jìn)樣針的抽樣速度，使抽樣時間至少3-5秒
自動進(jìn)樣器的注射器密封不嚴(yán)/注射器三通閥磨損更換新的注射器/注射器三通閥，需要時請打400電話
基線周期性波動泵壓力波動采集壓力通道的信號，尋找壓力波動的原因
管路或流通池中有氣泡流動相充分脫氣
基線無規(guī)律波動溫度波動控制好溫度，使用對溫度較敏感的RI檢測器時要尤為注意
流動相混合不均勻1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合
檢測器燈能量過低更換新燈
流通池被污染用不同極性溶劑沖洗流通池
流動相或色譜柱被污染更換流動相或色譜柱
電壓不穩(wěn)或儀器接地不正確常見于CAD/ECD，請打400電話
紫外檢測器波長低于溶劑截止波長1）選擇合適的流動相進(jìn)行分析；2）改變檢測波長
其他蠕動泵抽不出溶液1）彎頭注射器抽出管路氣泡；2）清理擠壓部位；3）更換新的軟管
提示密封圈泄露超限1）更換密封圈和/或柱塞桿；2）向右擠壓蠕動泵杠桿
Vanquish更換流通池時的注意事項先關(guān)掉檢測器模塊的總電源再進(jìn)行更換